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제   목 항바이러스 단백질, 유산균으로 닭 몸속까지 옮긴다.
작 성 자 농업기술센터 등 록 일 2020-02-03 조   회 10
첨부파일
 
 
 항바이러스 단백질, 유산균으로 몸속까지 옮긴다.
- 미니항체(3D8) 유산균 먹은 , 항바이러스 효과 확인 -
 
농촌진흥청(청장 김경규)은 유산균(L. paracasei1) )이 닭의 몸속으로 미니항체(3D8 scFv) 단백질2) 을 옮기는 운반체 기능을 할 수 있다고 밝혔다.
 ○ 국립축산과학원은 선행 연구에서 미니항체 단백질을 발현하는 형질전환 닭이 여러 종류의 바이러스에 항바이러스 효과가 있음을 확인했다. 또한 항바이러스 소재 물질로써 활용될 수 있는 가능성을 제시했다.
 ○ 미니항체 단백질을 동물의 항바이러스 소재로 활용하기 위해서는 동물 몸속으로 소재 물질을 옮겨줄 운반체가 필요하다.
 
□ 국립축산과학원은 유산균을 미니항체 단백질의 운반체로 활용할 수 있는지를 확인하기 위해 연구를 진행했다.
 ○ 먼저, 미니항체 단백질 유전자를 생명공학기술을 이용하여 유산균에 도입해 형질전환(3D8 scFv) 유산균을 만들었다.
 ○ 이 형질전환(3D8 scFv) 유산균을 바이러스에 감염된 닭에게 먹여 미니항체 단백질을 닭의 몸속으로 운반했다.
 
 ○ 그 결과, 형질전환(3D8 scFv) 유산균을 먹은 닭에서 바이러스 검출량이 줄어들었다. 이는 형질전환(3D8 scFv) 유산균이 저병원성 조류인플루엔자(H9N2)에 대한 항바이러스 효과가 있음을 보여준다.  
 ○ 또한, 유산균이 효과적으로 미니항체 단백질을 닭의 체내로 운반할 수 있으며, 운반체로써의 활용 가능성이 높다는 것을 의미한다.
 
□ 농촌진흥청 국립축산과학원 박응우 동물바이오공학과장은 “지금 형질전환 유산균을 직접 가축에 활용하기는 어렵지만, 이번 연구는 항바이러스 단백질 운반체로써 유산균의 활용 가능성을 학술적으로 밝혔다는 점에 의의가 있다.”라며
 ○ “재조합 미니항체 단백질을 직접 항바이러스 소재로 이용하는 연구도 추진하고 있다.”라고 전했다.
 ○ 이번 연구 결과는 국제학술지인 헝가리 수의학회지(Acta Veterinaria Hungarica)3) 201912월호에 실렸다.
 
【참고자료】형질전환 유산균을 먹인 닭에서 항바이러스 효과 분석
보도자료 관련 문의나 취재는
농촌진흥청 동물바이오공학과 변승준 농업연구관(063-238-7263)에게
연락 바랍니다.
 
 
 
 
 
<참고자료>
 
형질전환 유산균을 먹인 닭에서 항바이러스 효과 분석
□ 닭 바이러스 접종 실험
 ○ 미니항체(3D8 scFv) 단백질 발현하는 형질전환용 벡터4)
 
그림입니다. 원본 그림의 이름: 3D8 그림1.png 원본 그림의 크기: 가로 590pixel, 세로 178pixel 사진 찍은 날짜: 2020년 01월 23일 오후 9:46
            (A)                                       (B)
 
* (A)는 형질전환 유산균에서 미니항체 단백질이 유산균 몸 밖으로 분비되는 형태(Secret construct)
* (B)는 형질전환 유산균에서 미니항체 단백질이 유산균 세포벽에 부착되는 형태(Anchor construct)
 
 ○ 바이러스 접종 실험 모식도
그림입니다. 원본 그림의 이름: 3D8 그림2.png 원본 그림의 크기: 가로 306pixel, 세로 203pixel 사진 찍은 날짜: 2020년 01월 23일 오후 9:46
* 코에 바이러스를 직접 감염(AIV challenge)시킨 닭 3마리
  직접 감염군과 혼사한 간접 감염군(Contact transmission) 7
 
 ○ 닭에서 바이러스 샘플링 일정
 
그림입니다. 원본 그림의 이름: 3D8 그림3.png 원본 그림의 크기: 가로 436pixel, 세로 211pixel 사진 찍은 날짜: 2020년 01월 23일 오후 9:46
 
* 바이러스 감염 후, 간접 감염군(7마리)의 항문 및 구강에서 
  감염 3, 5, 7, 9일차에 면봉으로 바이러스 채취
* qRT-PCR 방법으로 바이러스 배출량을 정량함
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
□ 닭에서 형질전환 유산균의 항바이러스 효과
 ○ 간접 감염군(7마리) 닭의 항문 및 구강에서 바이러스 배출량
 
 
구강
항문
3
그림입니다. 원본 그림의 이름: 바이러스 배출량  그림(2).png 원본 그림의 크기: 가로 385pixel, 세로 558pixel 사진 찍은 날짜: 2020년 01월 23일 오후 10:02
5
7
9
 
* G1 : 형질전환(Secret construct) 유산균 섭취
  G2 : 형질전환(Anchor construct) 유산균 섭취
  G3 : 비형질전환(wild-type) 유산균 섭취
  G4 : 일반사료만 섭취
* G1 처리구가 다른 시험구(G2, 3, 4) 대비 감염 9일차 구강에서 바이러스 배출량이 감소함을 보여주고 있음
* 형질전환(Secret construct) 유산균의 항바이러스 효과 확인

1)  L. paracaseil : Lactobacillus paracasei
2)  3D8 항체 : 자가 면역질환 생쥐에서 발굴한 항체단백질로 핵산(DNA RNA)을 분해함.
3)  AVIAN INFLUENZA VIRUS TRANSMISSION IS SUPPRESSED IN CHICKENS FED LACTOBACILLUS PARACASEI EXPRESSING THE 3D8 SINGLE-CHAIN VARIABLE FRAGMENT PROTEIN
4)  DNA 운반체

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